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常见细胞涂片制片问题及解决方法
1、细胞量少: 用尖底大试管重复离心和1ml尖底离心管再离心方法处理。
2、红细胞太多:离心后吸取上层沉淀物,放入酒精冰醋酸液(25%酒精95ml+5ml冰醋酸)内,打匀,再离心沉淀。然后,吸取沉淀物。(离心涂片机)
3、细胞收缩:主要是涂片水分太多,烘干后细胞容易收缩。解决方法,离心后要把试管内的液体全部吸干。其次选择细胞收缩较小的固定液。
4、细胞深染:一种原因是染色过深,解决方法:再分化。另一种是细胞收缩,导致细胞核易着色,解决制片问题
5、结晶:一种是苏木素结晶,呈不规则形状,解决方法,过滤或更换苏木素。另一种是点状结晶,通常有成片或成簇分布,有时在细胞核上,此为空气结晶,原因是涂片从二甲苯透明出来后,在空气中暴露时间太长,二甲苯挥发,发生干燥所形成的。解决方法,在封片时,不要拿出太多的涂片,根据当时的温度、湿度和自己封片的速度,调整涂片的数量,一般一次以3-5张为佳。
6、涂片上的水珠:脱水不干净或在封片时空气太潮湿所造成,解决方法:从高浓度酒精退至低浓度酒精,再从低浓度酒精至高浓度酒精,特别要保证低浓度酒精的时间,大多数脱水不干净的原因都是脱水太快,在低浓度酒精内停留时间太短所造成。